Evaluación de la formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por el método semicuantitativo de microtitulación con cristal violeta y el cualitativo de agar con rojo Congo / Assessment of biofilms formation of bacterial and fungal isolates using qualitative Congo red agar and semiquantitative crystal violet microtiter methods

Introducción. El 65 % de las infecciones humanas son producidas por bacterias o levaduras, cuya capacidad de formar biopelículas las hace más resistentes a los antimicrobianos y antifúngicos. Objetivo. Determinar la capacidad de formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por medio de los métodos cuantitativo de microtitulación con cristal violeta y cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo. Materiales y métodos. Con el método cuantitativo, se utilizaron los medios de cultivo infusión cerebro-corazón, tripticasa de soya y Müeller-Hinton para aislamientos bacterianos; para levaduras, se usaron caldo infusión cerebro-corazón y Sabouraud dextrosa. Para el método cualitativo de cultivo en agar, se utilizaron los mismos medios de cultivo más una solución con 3 % de rojo Congo y 10 % de dextrosa. Cómo método de referencia, se utilizó la propuesta de Stepanovic et al. Resultados. Se evaluaron 103 aislamientos bacterianos y 108 de levaduras. No es recomendable sustituir el caldo infusión cerebro-corazón por los caldos tripticasa de soya y Müeller-Hinton en el método cuantitativo, para evaluar la formación de biopelículas en los aislamientos bacterianos. El medio Sabouraud dextrosa, en caldo y agar, puede sustituir al de infusión de cerebro-corazón para evaluar la formación de biopelículas en levaduras, tanto por el método cuantitativo como por el cualitativo. Conclusión. El estudio de las biopelículas en el laboratorio de microbiología, a partir del método cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo, es un procedimiento sencillo, rápido y de bajo costo, que proporciona información útil para el diagnóstico y la terapéutica de infecciones persistentes causadas por bacterias y levaduras.

Introduction. Sixty-five percent of human infections are caused by bacteria or yeasts able to form biofilms. This feature makes them more resistant to antimicrobials and antifungals. Objective. To determine biofilm formation capacity of bacterial and fungal isolates by quantitative crystal violet microtiter and qualitative Congo red agar methods. Materials and methods. Brain-heart infusion, trypticase soy broth and Müeller-Hinton culture media were used in bacterial isolates for the quantitative method; brain-heart infusion broth and Sabouraud dextrose were used for yeasts. The same culture media plus 3% Congo red and 10% dextrose were used to apply the qualitative method in agar. The proposal by Stepanovic, et al. was used as a reference method. Results. We evaluated 103 bacterial isolates and 108 yeasts isolates. We did not recommend substitute brain-heart infusion broth for trypticase soy and Müeller-Hinton broths for biofilm formation assessment in bacterial isolates using the quantitative method. Sabouraud dextrose medium, both broth and agar, can replace brain-heart infusion to assess biofilm formation in yeasts, quantitatively and qualitatively. Conclusion. The study of biofilms in the microbiology laboratory, using Congo red agar qualitative method, is a simple, fast, and inexpensive procedure that provides precise information for the diagnosis and treatment of persistent infections caused by bacteria and yeasts.

Assessment of biofilms formation of bacterial and fungal isolates using qualitative Congo red agar and semiquantitative crystal violet microtiter methods / Evaluación de la formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por el método semicuantitativo de microtitulación con cristal violeta y el cualitativo de agar con rojo Congo

Introduction. Sixty-five percent of human infections are caused by bacteria or yeasts able to form biofilms. This feature makes them more resistant to antimicrobials and antifungals. Objective. To determine biofilm formation capacity of bacterial and fungal isolates by quantitative crystal violet microtiter and qualitative Congo red agar methods. Materials and methods. Brain-heart infusion, trypticase soy broth and Müeller­Hinton culture media were used in bacterial isolates for the quantitative method; brain-heart infusion broth and Sabouraud dextrose were used for yeasts. The same culture media plus 3% Congo red and 10% dextrose were used to apply the qualitative method in agar. The proposal by Stepanovic, et al. was used as a reference method. Results. We evaluated 103 bacterial isolates and 108 yeasts isolates. We did not recommend substitute brain-heart infusion broth for trypticase soy and Müeller-Hinton broths for biofilm formation assessment in bacterial isolates using the quantitative method. Sabouraud dextrose medium, both broth and agar, can replace brain-heart infusion to assess biofilm formation in yeasts, quantitatively and qualitatively. Conclusion. The study of biofilms in the microbiology laboratory, using Congo red agar qualitative method, is a simple, fast, and inexpensive procedure that provides precise information for the diagnosis and treatment of persistent infections caused by bacteria and yeasts.

Introducción. El 65 % de las infecciones humanas son producidas por bacterias o levaduras, cuya capacidad de formar biopelículas las hace más resistentes a los antimicrobianos y antifúngicos. Objetivo. Determinar la capacidad de formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por medio de los métodos cuantitativo de microtitulación con cristal violeta y cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo. Materiales y métodos. Con el método cuantitativo, se utilizaron los medios de cultivo infusión cerebro-corazón, tripticasa de soya y Müeller-Hinton para aislamientos bacterianos; para levaduras, se usaron caldo infusión cerebro-corazón y Sabouraud dextrosa. Para el método cualitativo de cultivo en agar, se utilizaron los mismos medios de cultivo más una solución con 3 % de rojo Congo y 10 % de dextrosa. Cómo método de referencia, se utilizó la propuesta de Stepanovic et al. Resultados. Se evaluaron 103 aislamientos bacterianos y 108 de levaduras. No es recomendable sustituir el caldo infusión cerebro-corazón por los caldos tripticasa de soya y Müeller-Hinton en el método cuantitativo, para evaluar la formación de biopelículas en los aislamientos bacterianos. El medio Sabouraud dextrosa, en caldo y agar, puede sustituir al de infusión de cerebro-corazón para evaluar la formación de biopelículas en levaduras, tanto por el método cuantitativo como por el cualitativo. Conclusión. El estudio de las biopelículas en el laboratorio de microbiología, a partir del método cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo, es un procedimiento sencillo, rápido y de bajo costo, que proporciona información útil para el diagnóstico y la terapéutica de infecciones persistentes causadas por bacterias y levaduras.

Polimorfismos G2548A del gen de leptina y GLN223ARG del gen del receptor de leptina en pre-puberes con riesgo cardiometabólico / Polymorphism G2548A in leptin and GLN223ARG in the leptin receptor gene in prepubertal children with cardiometabolic risk

La obesidad resulta de los efectos combinados de los genes, el ambiente y el estilo de vida. La leptina (LEP) y el receptor de leptina (LEPR) son genes que han sido evaluados en la búsqueda de variantes que podrían estar relacionadas con la obesidad y sus complicaciones cardiometabólicas. Objetivo: Evaluar la posible asociación entre los polimorfismos G2548A del gen LEP y Gln223Arg del gen LEPR con el desarrollo de obesidad y resistencia a la insulina (RI) en niños y adolescentes pre-púberes. Métodos: Se estudiaron 314 niños de 2-11 años, clasificados según los parámetros antropométricos y bioquímicos en: a) sobrepeso/obesos sin RI (n=133), b) sobrepeso/obesos con RI (n=75) y c) controles sanos (n=70). La genotipificación fue realizada por reacción en cadena de la polimerasapolimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (PCR-RFLP); se estudiaron las asociaciones entre genotipo y riesgo, y se compararon los promedios de las medidas antropométricas y bioquímicas. Resultados: La frecuencia genotípica para el polimorfismo G2548A del gen LEP fue 51% G/A, 33% G/G y 16% A/A; para el polimorfismo Gln223Arg del gen LEPR fue Gln/Arg 49%, Gln/Gln 31% y Arg/Arg 20%. Se encontró diferencia significativa en la distribución de los diferentes genotipos del gen de LEPR en los niños con sobrepeso/obesidad y RI con respecto al grupo control (OR= 2,6; IC 95%=1,17-5,75; p < 0.05). Conclusión: Se observó una asociación entre la presencia del genotipo Gln/Gln del gen LEPR con la RI (factor de riesgo cardiometabólico), presentando los niños con sobrepeso/obesidad y RI 2,6 veces más riesgo a presentar RI.

Obesity is a result of the combined effects of genes, environment and lifestyle. The Leptin (LEP) and leptin receptor (LEPR) are genes that have been extensively evaluated in search for variants that may be associated with obesity and cardiometabolic complications. Objective: To evaluate the possible association between polymorphisms G2548A of the LEP gene and Gln223Arg of the LEPR gene with the development of obesity and insulin resistance (IR) in prepubertal children and adolescents. Methods: We studied 314 children 2-11 years, grouped by anthropometric and biochemical parameters: a) overweight /obese without IR (n = 133), b) overweight /obese with IR (n = 75) and c) healthy controls (n = 70). Genotyping was performed by Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphisms (PCR-RFLP) method. Genotype-risk associations were studied. We then compared the average values for anthropometric and biochemical parameters. Results: The genotypic frequency for polymorphism G2548A of LEP gene was 51% for the G/A genotype, 33% G/G and 16% A/A genotype; for polymorphism Gln223Arg of LEPR gene was of Gln/Arg 49%, Gln/Gln 31% and Arg/Arg 20%. Significant difference was found in the distribution of different genotypes of the LEPR gene in children with overweight/obesity with IR compared to the control group (OR = 2.6; 95% CI = 1.17 to 5.75; p < 0.05). Conclusion: We observed an association between the presence of Gln/Gln genotype of the LEPR gene with insulin resistance (cardiometabolic risk factor) children, rendering these children with overweight/obese with IR 2,6 times more likely to be with insulin.

Fat Intolerance in Apparently Healthy Individuals with Normal Fasting Lipoproteins Is Associated with Markers of Cardiovascular Risk.

BACKGROUND: Postprandial increase of triglyceride-rich lipoproteins augments the risk of atherosclerotic cardiovascular disease and all-cause mortality. We explored the hypothesis that a simplified oral fat tolerance test can uncover differences in postprandial triglyceride response associated with potentially atherogenic lipoprotein characteristics, even in a cohort of apparently healthy 31-year-old [mean (SD), 31 (11)] nonobese individuals with normal fasting lipids and lipoproteins. METHODS: We used a fat tolerance test in 96 females and 62 males with blood sampled at 0, 2, and 4 h after a breakfast containing 26.3 g of fats. The postprandial triglyceride response was used to classify the individuals in apparently fat-tolerant and apparently fat-intolerant participants. RESULTS: The intolerant individuals were found to have at 0 h significantly higher body mass index, plasma triglycerides, remnant cholesterol, VLDL cholesterol, and LDL cholesterol and lower apolipoprotein (apo) AI and HDL cholesterol than the tolerant individuals. More than 70% of the variability (r2) of the postprandial response in tolerant and intolerant individuals measured as area under the curve or, at a single point at 4 h after the oral fat load, was linearly correlated with 0-h triglycerides (P < 0001). Fasting lipoprotein parameters, proposed to be markers of cardiovascular risk, as the ratios apo B/apo AI, total cholesterol/HDL cholesterol, and triglycerides/HDL cholesterol, were increased in the intolerant individuals. CONCLUSIONS: A simplified oral fat tolerance test, even when used in an apparently healthy, nonobese, normolipidemic cohort, detected that an increased postprandial triglycerides response was associated with augmented lipoprotein markers of increased cardiovascular risk.

Polimorfismo GLY972ARG del Gen sustrato de receptor de insulina 1 en pre-púberes con riesgo cardiometabólico / GLY972ARG plymorphism in the insulin receptor substrate 1 Gene in prepubertal children with cardiometabolic risk

Introducción: El sustrato del receptor de insulina 1 (IRS1) es un componente importante de la cascada de transducción de señales de la insulina y podría estar relacionado con los trastornos metabólicos asociados al síndrome metabólico. Objetivo: Evaluar el papel del polimorfismo Gly972Arg del gen IRS1 con factores de riesgo cardiometabólicos en niños pre-púberes. Metodología: Se estudiaron 279 niños con edades comprendidas entre 2-12 años, clasificados según los parámetros antropométricos y bioquímicos en: a) niños obesos sin RI (n=135), b) niños obesos con RI (n=80) y c) niños controles sanos (n=64). A cada niño se le realizó una extracción de sangre en ayunas y una postprandial, para determinar glicemia e insulina basal y postprandial, triglicéridos, colesterol total y fraccionado y la frecuencia genotípica del SNP Gly972Arg. Resultados: Se observó que 37,5% de los niños presentó RI; 9,6% hiperglicemia en ayunas; 27,3% hipertrigliceridemia y 50,46% bajos niveles de HDL-c. La frecuencia genotípica fue 89% genotipo Gly/Gly y 11% genotipo Gly/Arg. Se encontró diferencia significativa en la distribución de los diferentes genotipos del gen de IRS1 en los niños con sobrepeso/obesidad sin RI y niños con sobrepeso/obesidad con RI con respecto al grupo control (OR= 4,47; IC 95%=0,96-16,92; p < 0,05) y (OR= 4,43; IC 95%=0,93-21,00; p < 0,05) respectivamente. Conclusión: Se observó una asociación entre la presencia del genotipo Gly/Arg del gen IRS1 con sobrepeso/obesidad (factor de riesgo cardiometabólico) en los niños del estudio, presentando estos niños 4 veces más riesgos a presentar sobrepeso/obesidad que los niños con el genotipo Gly/Gly.

Introduction: Insulin receptor substrate 1 (IRS-1) is an important component of the insulin signal transduction cascade and could be related with metabolic disorders associated with metabolic syndrome (MS). Aim: Evaluate the role of the Gly972Arg polymorphism in the IRS1 gene in prepubertal children with cardiometabolic risk factors. Methods: We studied 279 children between 2-12 years of age, divided in groups 3 groups: a) obese children without insulin resistance (IR) (n=135), b) obese children with IR (n=80) and c) healthy children as controls (n=64). Basal and postprandial glucose, insulin, triglycerides, total and fractionated cholesterol and genotype frequency of the Gly972Arg SNP were determined in fasting and postprandial samples in each child. Results: 37.5% of the children had IR; in the fasting state, 9.6% had hyperglycemia, 27.3% hypertriglyceridemia and 50.46 % low HDL-C. The genotypic frequency was 89% for the Gly / Gly genotype and 11% Gly / Arg genotype. Significant difference was found in the distribution of the different genotypes of the IRS1 gene in children with overweight/obesity without IR and children with overweight/obesity with IR compared to the control group (OR = 4.47;CI 95% = 0.96-16.92; p <0.05) and (OR = 4.43; CI 95%= 0.93 - 21.00, p <0.05) respectively. Conclusion: Association between the presence of Gly/Arg genotype of the IRS1 gene with overweight/obesity (cardiometabolic risk factor) was observed in the studied children. These children were four times more likely to be overweight/obese than children with Gly / Gly genotype.

Polimorfismo PRO12ALA del gen PPARy2, ALA54THR del gen FABP2 y polimorfismos del gen de alipoproteina E en habitantes del sector los eucaliptos de la parroquia san juan, munisipio libertador / PRO12ALA polymorhism of the PPARy2 gene, ALA54THR polymorphism of the FABP2 gene and polymorphisms of the apolipoprotein E gene in the population of Eucapliptos of the parroquia san jua, municipio libertador

Las enfermedades cardiovasculares y el síndrome metabólico son patologías que afectan a gran parte de la población mundial, de etiología poligénica y multifactorial, resultado de la interacción entre factores genéticos, ambientales, sociales y culturales. Los principales genes candidatos a estudiar son aquellos relacionados con la regulación de la homeostasis de la glucosa, del metabolismo lipídico y/o de la secreción y acción de la insulina, como son el gen de los Receptores de los Proliferadores Perixosomales Activados gamma 2 (PPARγ2), la Proteína Enlazante de Ácidos Grasos Intestinal (FABP2) y la Apolipoproteína E (ApoE). Evaluar la relación entre los polimorfismos Pro12Ala del gen PPARγ2, Ala54Thr del gen FABP2 y del gen de ApoE en habitantes del Sector “Los Eucaliptos” de la Parroquia San Juan. 308 individuos de dicha comunidad, 98 hombres y 210 mujeres, clasificados en hipercolesterolémicos, hipertrigliceridémicos, resistentes a la insulina y controles de acuerdo a sus niveles de colesterol total, triglicéridos e índice HOMA. Extracción de 10 mL de sangre venosa para la determinación de química sanguínea y extracción de ADN, amplificación mediante PCR de un fragmento de 102pb del gen de PPARγ2, uno de 180pb del gen de FABP2 y otro de 244pb del gen de ApoE, y posterior RFLP. Se encontró una frecuencia alélica de 0,91 para el alelo Pro y 0,09 para el Ala del gen de PPARγ2; 0,70 para el alelo Ala del gen FABP2 y 0,30 para el Thr, mientras que para los alelos del gen de ApoE la frecuencia fue de ε2=0,05, ε3=0,80 y ε4=0,15. Se encontró relación entre el alelo ε4 de ApoE y la hipercolesterolemia, además del alelo ε2 como factor protector ante el desarrollo de hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y resistencia a la insulina, no encontrándose asociación alguna entre los polimorfismos de los restantes genes y las patologías mencionadas.

Cardiovascular disease and metabolic syndrome are diseases that affect worldwide, with multiple genetic and environmental components contributing to susceptibility. The main candidate genes to study are those related to the regulation of glucose homeostasis, lipid metabolism, insulin secretion and action and obesity, these include the genes for Peroxisome proliferator-activated receptor gamma 2 (PPARγ2), fatty acid-binding protein 2 (FABP2) and Apolipoprotein E (Apo E). The aim of this study was to investigate the relationship between polymorphisms of Pro12Ala PPARγ2 gene, Ala54Thr FABP2 gene and the ApoE gene in residents from the “The Eucaliptus” of the “Parroquia San Juan”. 308 subjects, 98 men and 210 women, classified as hypercholesterolemic, hypertriglyceridemic, insulin resistant and controls according to their levels of total cholesterol, triglycerides and HOMA index. Extraction of 10 mL whole blood for determination of chemistry and DNA extraction, PCR amplification of a 102 bp fragment PPARγ2 gene, a 180 bp FABP2 gene and a 244 bp of ApoE gene, and subsequent RFLP. An allele frequency for allele Pro 0.91 and 0.09 for gene PPARγ2 Ala and 0.70 for the allele of the gene FABP2 Ala and 0.30 for Thr, while for the different alleles of ApoE gene frequency was ε2=0.05, ε3=0.80 and ε4=0.15. We found a relationship between the ApoE ε4 allele and hypercholesterolemia, in the other hand, Apo E ε2 allele was found as a protective factor against the development of hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia and insulin resistance, we did not found association between polymorphisms of the other genes and the pathologies mentioned above.

Polimorfismos del gen de apolipoproteína E y polimorfimo Pro12Ala del gen PPARy-2 en niños pre-puberes con factores de riesgo cardiometabólicos / Apolipoprotein E gene polymorphisms and Pro12Ala polymorfphism of PPARy-2 gene in children with risk factors to cardiometabolic disease

La resistencia a la insulina es muy frecuente en niños y adolescentes obesos, la cual conlleva a un significativo riesgo de desarrollar enfermedades cardiometabólicas causadas por la combinación de factores genéticos y factores asociados al estilo de vida. Evaluar la relación entre los polimorfismos del gen ApoE y el polimorfismo Pro12Ala del gen PPARγ2 en niños pre-púberes con factores de riesgo cardiometabólicos. Población y Métodos: Se evaluaron 141 niños (CANIA y Hospital “JM de los Ríos”), de los cuales 46 tienen obesidad, 33 hipercolesterolemia, 30 resistentes a la insulina (RI) y 32 controles. Se determinó colesterol total y fracciones, triglicéridos, glucosa, insulina e índice HOMA; se realizó extracción de ADN y análisis de los polimorfismos. La distribución de la frecuencia del alelo ε4 del gen de ApoE fue: 10,9% obesos, 7,6% hipercolesterolémicos, 18,3% RI y 4,6% controles. La frecuencia del polimorfismo Pro12Ala fue de 6,4% en la población estudiada. En los niños obesos e hipercolesterolémicos se observó aumento de colesterol total, LDL-c y triglicéridos asociados con la presencia del ε4; en el grupo con RI, se encontró que existen diferencias estadísticamente significativas entre el alelo ε4 con respecto al grupo control, lo que refiere que puede haber una relación clínica importante entre la presencia del alelo y el desarrollo de la enfermedad. No se encontró relación entre el polimorfismo Pro12Ala del gen PPARγ2 con factores de riesgo cardiometabólico. La presencia de varios polimorfismos en un mismo individuo podría estar asociada a factores de riesgo para enfermedad cardiometabólica

Insulin resistance (IR) is very frequent in children and adolescents obeses, which could contribute significantly in the development of cardiometabolic diseases, this could be associated to a combination of genetics factors and life’s style. Aim: To evaluate the relationship between ApoE gene polymorphisms and PPARγ2 gene Pro12Ala polymorphisms with risk factors to cardiometabolic disease in children. Population and Materials: 141 children (CANIA and Hospital “JM de los Ríos”), 46 with obesity, 33 with hypercholesterolemia, 30 with IR and 32 normal subjects. Total cholesterol and fractions, glucose, insulin and triglycerides were measured; also it was determinated the polymorphism genes on each patient. Results: The distribution of the frequency of the allele E4 of the ApoE gene were: 10, 9% obese, 7,6% hypercholesterolemia, 18,3% IR and 4,6% on normal subjects. The frequency of Pro12Ala polymorphism were up to 6,4% on the total subjects in the study. In the obese and hypercholesterolemic groups we found an increase of the total cholesterol, LDL-c and triglycerides, associated with the presence of allele ε4. In children with IR we got a significant difference of the presence of allele ε4 compared with the control group, which means that this allele could be related with the development of thedisease. It was not found a relation between the Pro12Ala of PPARγ2 gene and the development of obesity, hypercholesterolemia and insulin resistance in children. The presence of several polymorphisms in a same individual could be associated with risk factors to cardiometabolic disease

Polimorfismo de los genes C677T de la enzima metil-n-tetrahidrofolato reductasa, A2756G de la enzima metionina sintasa y A66G de la enzima metionina sintasa reductasa y su relación con la homocisteína en pacientes con enfermedades cardiovasculares / C677T gene polymorphism of the enzyme-n-methyl-tetrahydrofolate reductase, A2756G gene polymorphism of the enzyme methionine synthase and A66G gene polymorphism of methionine synthase reductase and its relationship with homocysteine in patients with cardiovascular disease

La Hiperhomociteinemia (HHcy) se considera como un factor de riesgo idenpendiente para el desarrollo de aterosclerosis y de enfermedad arterial coronaria (EAC). Los polimorfismos en encimas involucradas en la regulación del metabolismo de la Hcy como la metiltetrahidrofolato reductasa (MTHFR), metionina sintasa (MTR), y la metionina sintasa reductasa (MTRR) pueden contribuir a la variación de los niveles de homocisteína en plasma (Hcy). En este estudio investigamos la asociación de los polimorfismos genéticos de las enzimas involucradas en la remetilación de la homocisteínia: metionina sintasa (MTR), metil N-tetrahidrofolato reductasa (MTHFR) y metionina sintasa reductasa (MTRR), con los niveles de Hcy en pacientes con EAC y sujetos sanos. Población 136 individuos de los cuales 90 presentaron diagnóstico de enfermedad cardiovascular (IAM y ACV) y 46 eran aparentemente sanos (controles). La concentración de Hcy fue significativamente más alta en pacientes con ECV que en los sujetos control (P<0,001). HHcy (>15 µmol/L) confirió un RR de IAM de 2.52 (95% IC: 1.4-4.4, P<0,001) y de ACV de 1.88 (95% IC: 1.0-3-5, P<0,05). Los niveles de vitamina B12 y folato se encontraba en el rango de los valores de referencia en el 86% de los individuos. La frecuencia del alelo T para C677T de MTHFR, del alelo G para A66G de MTRR y del alelo G para A2756G de MTR fueron 0.31, 0.30, 0.22 respectivamente para los sujetos casos. Los polimorfismos C677T, A66G y A276G de los genes MTHFR, MTRR y MTR no tuvieron diferencia estadísticamente significativa entre el grupo de casos con respecto al grupo control. Los polimorfismos estudiados no se relacionaron estadísticamente con la HHcy en los individuos en estudio. Sugerimos que HHcy confiere riesgo para ECV. En nuestro estudio encontramos evidencia de que la regulación de Hcy es poligénica.

The Hiperhomocysteinemia (HHcy) is considered an independent risk factor for developing atherosclerosis and cardiovascular arterial disease (CAD). The polymorphisms of the enzymes involved in the regulation of homocysteine (Hcy) metabolism as the methyltetrahydrofolate reductase (MTHFR), methionine synthase (MTR) and methionine synthase reductase (MTRR) may contribute to the elevation of Hcy in plasma. The main aim of the this study was to investigate the association of genetic polymorphisms of the enzymes involved in remethylation of homocysteine: methionine synthase (MTR), N-methyl tetrahydrofolate reductase (MTHFR) and methionine synthase reductase (MTRR), with levels of Hcy in patients with CHF and healthy subjects. Population: 136 subjects of whom 90 had a diagnosis of cardiovascular disease (heart failure and stroke) and 46 were apparently healthy (controls). The concentration of Hcy was significantly higher in patients with cardiovascular disease than compare with the control group (P<0.001). HHcy (>15 mmol/L) conferred a relative risk (RR) of heart failure of 2.52 (95% CI: 1.4-4.4, P <0.001) and stroke, RR of 1.88 (95% CI: 1.0-3.5, P <0.05). The levels of vitamin B12 and folate was in the range of reference values in 86% of subjects. The frequency of the T allele of MTHFR C677T was 0,31, for the G allele of MTRR A66G was 0,30 and for the G allelwe for MTR A2756G was 0.22 for the subjects with heart failure and stroke referred as case. C677T polymorphism, A66G and A2756G of the genes MTHFR, MTRR and MTR had no associated statistically with HHcy in the subjects of the study. We suggest that HHcy confers risk for CVD. In our study we found evidence that the regulation of Hcy is polygenic.

Marcadores de inflamación y disfunción endotelial en niños con infección bacteriana / Inflammation and endothelial dysfunction markers in children with bacterial infection

La ateroesclerosis comienza en etapas tempranas de la vida y la disfunción endotelial se reconoce como el acontecimiento inicial dominante en su desarrollo. Estudiar marcadores de inflamación y disfunción endotelial en niños con infección bacteriana. Se estudiaron 36 niños (6 meses-10 años 11 meses) hospitalizados con diagnóstico de infección bacteriana. Se tomó sangre venosa en tres fases: I (fase aguda infección, ingreso), II (convalecencia, 1 semana post-admisión), III (recuperación, 1 mes postadmisión). 32 niños sanos de la consulta. En todos los pacientes y controles se determinó: colesterol total y fracciones, triglicéridos, proteínas totales y fraccionadas, PCR ultrasensible (PCRus), sICAM-1, sVCAM-1, IL-6, óxido nítrico. En los niños con infección se encontró: 1) niveles de colesterol total elevados: aumento en las fracciones de LDL-C y LP(a)- C en la fase I con el pico en fase II y disminución con la recuperación del niño, 2) aumento del perfil inflamatorio mediado por IL-6, con el subsecuente aumento de la PCRus y alfa 2 globulinas, las cuales disminuyen en la fase de recuperación. Los marcadores de disfunción endotelial sVCAM-1 e sICAM-1 aumentan en la fase I y disminuyen con la recuperación. Los marcadores de inflamación (IL-6, PCRus) mantienen correlación positiva con los marcadores de disfunción endotelial (sVCAM-1 e sICAM-1). Los niveles de óxido nítrico estuvieron disminuidos en las tres fases. La infección aguda bacteriana en la niñez se asocia al aumento de los marcadores inflamatorios, lo cual apoya el papel potencial de éstos en la patogénesis de la ateroesclerosis temprana

Markers of inflammation and endothelial dysfunction in children with bacterial infections. Atherosclerosis begins early in life and endothelial dysfunction is recognized as the key initiating event in the development of atherosclerosis. To study biomarkers of inflammation and endothelial dysfunction in children with bacterial infection. The study included 36 children (6 months-10 years 11 months) hospitalized with the diagnosis of bacterial infection. Venous blood was extracted in three phases: I (acute phase of infection, entry), II (convalescence, 1 week post-admission), III (recovery, 1 month post-admission). 32 children who attended the healthy children outpatient clinic were the control group. The following parameters were assessed in all patients and controls: cholesterol and its fractions, triglycerides, total and fractionated proteins, high sensitivity C-reactive protein (hsCRP), sICAM-1, sVCAM-1, IL-6, nitric oxide. Children with infection had high total cholesterol levels with increased LDL-C and Lp (a)-C fractions in phase I, rising to a peak in phase II and decreasing as the child recovers. Infected children also had an increased inflammatory profile mediated by IL-6, with the subsequent increase in hsCRP and alpha 2 globulin, which decrease as the child recovers. Endothelial dysfunction markers sVCAM-1 and sICAM-1 increase at admission and decrease as the child recovers. Inflammation markers (IL-6, hsCRP) correlate positively with markers of endothelial dysfunction (sVCAM-1 and sICAM-1). Nitric oxide levels are decreased in all three phases. Acute infection in childhood is associated with damage to the endothelium. These results support the potential role of inflammatory stimuli in the pathogenesis of early atherosclerosis

Trigléciridos pospandriales y su relación con las enfermedades cardiovasculares / postpandrial triglyceride and their relation with the cardiovascular diseases

El estado pospandrial constituye la condición metabólica habitual en la que se encuentra el ser humani diariamente. Algunos sujetos presentan aumento de los triglicéridos totales y de las lipoproteíneas ricas en trigléceridos totales y de las lipoproteínas ricas en triglicéridos definiéndose como hiperlipemica pospandrial, generando incrementos del estrés oxidativo, inflamación y disfunción vascular, además está asociada con el riesgo de enfermedad cardiovascular, que en los últimos años se ha convertido en la principal causa de muerte en todo el mundo. El objetivo del esudio fue evaluar la relación entre los niveles de triglicéridos pospandriales de sujetos cardiópatas y accidente cerebrovascular (ACV) con sujetos aparentemente sanos. Se estudiaron 56 sujetos de los cuales 32 eran aparentemente sanos (clasificados según sus resultados de triglicéridos pospandriales en intolerantes a las grasas y tolerancia normal a las grasas), 11 con diagnóstico de cardiopatía y 13 con diagnóstico de ACV. A cada paciente se les realizó un extracción de sangre basal con 14 horas de ayuno, posteriormente se les suministró un desayuno de aproximadamente 24 gr de grasa (una empanada de queso y un café). Se tomó muestras para el estudio de los niveles de triglicéridos (basal y pospandrial 2 y 4 horas), colesterol total y sus fracciones, apolipoproteina A1 y B-100, fibrinógeno y proteína C reactiva ultrasensible. Se realizó TBARS para estimar los niveles de oxidación de las LDL y la prueba de afinidd de las LDL a proteoglicanos. Mediante ecodoppler se evaluó el complejo miointimal carotideo. Los pacientes cardiópatas e intolerantes a las grasas tuvieron niveles de triglicéridos por encima de los valores de referencia a las 2 y 4 horas después de comer (p<0,001). Las LDL del grupo de cardiópatas y ACV presentaron mayor afinidad a proteoglicanos y mayor oxidación que las LDL del grupo intolerante y normal (p<0,001)...

The postpandrial nonfasting state is the usual metabolic condition in the human. Some individuals had increased total triglycerides and triglyceride-rich lipoproteins, defined as postprandial hyperlipidemia, generatin an increase in oxidative stress, inflammation and vascular dysfunction also is associated with cardiovascular disease risk, which in recent years has become the leading cause of death worldwide. Aim: Evaluate the realtionship between postpandrial triglyceride levels of subjects with heart disease and stroke with apparently halthy subjects. We studied 56 subjects of whom 32 were apparently healthy (classified according to their results of postprandial triglyceride in fat intolerant and normal tolerance to fat), 11 have diagnosis of heart disease and 13 with diagnosis of stroke. From every patient, we withdrew blood after 14 hours of fasting as baseline, then were given a breakfast of about 24gr of fat (a typical venezuelan breakfast, which consisted in a cheese emapana and coffe). Samples were taken at basal time and 2 and 4 hours postpandrial o measure levels of triglicerides and also measure total cholesterol and its fractions, apolipoprotein A1 and B-100, fibrinogen and C-reactive protein. TBARS was performed to estimate the levels of LDL oxidation and proof affinity of LDL to proteoglycans. To evaluate the myointimal carotid complex we used a duplex Doppler echo. Patients with hearth disease and intolerance to fat had triglyceride levels above baseline values at 2 and 4 hours after eating (p<0.001). The level of LDL in the group of heart disease and stroke had higher affinity for proteoglycans and increased LDL oxidation than intolerant and normal group (p<0.001). The ratio Chol / HDL and LDL / HDL was higher in the intolerant and heart disease, indicating a risk factor for cardiovascular disease. The postprandial triclyceride measurement seems to be a better predictor of cardiovascular risk than measurement levels of triclyceride in...

Marcadores de inflamación y disfunción endotelial en sujetos obesos con/sin diabetes mellitus tipo 2 / Inflammatory markers and endothelial dysfunction in obeses with or without type 2 diabetes mellitus

La obesidad y la diabetes son patologías que desarrollan cambios en el ambiente molecular del organismo favoreciendo la expresión de citoquinas y diferentes mediadores pro-inflamatorios, proporcionado así, el daño al endotelio. El objetivo fue analizar la asociación entre la obesidad y los marcadores de inflamación y disfunción endotelial (PCRus, Fibrinógeno, IL-6, TNF-a,ICAM-1 y VCAM-1). Se tomaron muestras de sangre a 96 sujetos obesos con DT2, 24 sujetos obesos sin DT2, 24 sujetos no obesos con DT2 y 24 sujetos no obesos sin DT2 (controles). Siendo clasificados en obesos aquellos con un índice de masa corporal >30kg/m². El diagnóstico de diabetes tipo (2) (DT2) fue asignado según los criterios de la ADA. Se determinaron parámetros bioquímicos (glucosa e insulina), además se realizó el perfil inflamatorio (PCRus, fibrinógeno, IL-6, TNF-a), y de activación endotelial (VCAM-1, ICAM-1). Comparados con el grupo control los sujetos obesos con/sin DT2 y los sujetos no obesos con DT2 tienen niveles más elevados de PCRus (3,64± 1,72; 2,67±1,48; 1,25±1,02 frente a 0,75±0,49 de los controles), fibrinógeno (395,00±123,59; 431,13±118,32; 346,67±86,74 frente a 315,67±86,15 de los controles) e IL-6 (1,81±0,30; 2,71±0,80; 3,98±1,54 frente a 0,83±0,16 de los controles. Por otro lado, los sujetos obesos y no obesos con DT2 tenían valores más elevados de ICAM-1 (655,46±35,31 y 660,99±39,52 frente a 462,92±28,63 de los controles) y VCAM-1 ( 647,62±85,03 y 809,05±104,29 frente a 442,48±22,72 de los controles) el TNF-á no presentó diferencias entre los grupos en estudio. El incremento de los valores de VCAM-1 en los sujetos con DT2 (obesos o no), refleja lesión endotelial asociada a DT2 e indica la importancia de la prevención en los sujetos con síndrome metábolico en el que se está iniciando el daño al endotelio.

Obesity and Diabetes are pathologies tat are involved in the changes in the organ molecular environment that favor the expression of endothelial markers and secretion of different pro-inflammatory cytokines that injured the endothelium. Analyze the association between obesity, inflammatory marker and endothlial dysfunction (usCRP, fibrinogen, TNF-a, ICAM-1 and VCAm-1. Blood specimens were harvested of 96 subjects, 24 obeses with type 2 Diabetes Mellitus (T2DM), 24 obeses without T2DM, 24 non obeses with T2DM and 24 non obeses without T2DM (controls). The obeses were classified with a corporal mass index (CMI)>30kg/m². he diagnosis of T2DM was done following the ADA's criteria. Glucose, insulin, usCPR, fibrinogen, IL6, TNF-a, ICAM-1 and VCAM-1 levels were measured. The obeses with/Without T2DM and the non obeses with T2DM showed highly significant elevation levels of usCPR (3,64± 1,72; 2,67±1,48; 1,25±1,02 compared to 0,75±0,49 in controls), fibrinogen (395,00±123,59; 431,13±118,32; 346,67±86,74 compared to 315,67±86,15 in controls) and IL-6 (1,81±0,30; 2,71±0,80; 3,98±1,54 compared to 0,83±0,16 in controls) In the other hand, obeses y non obeses with T2DM showed highly significant elevations levels of ICAM-1 655,46±35,31 y 660,99±39,52 compared to 462,92±28,63 in controls) and VCAM-1 (647,62±85,03 y 809,05±104,29 compared to 442,48±22,72 in controls. TNF-á did not have significant differences between groups. Highly levels of VCAM-1 and ICAM-1 in subjects with T2DM (obeses or non obeses), likely to endothelial injure associated to T"DM and important markers of the beginning of endothelial injue and the cardiovascular disease.

Evolución de las alteraciones de lipoproteínas en niños con neumonía / Evolution of lipoprotein alterations in children with pneumonia

Se ha sugerido que las infecciones crónicas o a repetición puede contribuir con la aterogénesis aumentando la respuesta inflamatoria de la pared arterial, por contribuciones de la respuesta de fase aguda y alteraciones de las lipoproteínas. Estudiar la evolución de los cambios de las lipoproteínas en niños con neumonía. 46 niños (1 mesa 6 años de edad) hospitalizados con diagnóstico de neumonía. Se determinó colesterol y triglicéridos por método enzimático y las fracciones de lipoproteínas por electroforesis en agarosa y ultracentrifugación. Comparando con las muestras control (6 meses post-admisión), se hallaron substanciales alteraciones en los niveles de lipoproteínas (aumento de LDL y disminución de HDL) y su composición que persistieron después de 24-58 días post-admisión (fase de recuperación). Los análisis de composición de las VLDL, LDL y HDL aisladas por ultracentrifugación demostraron que la hipertrigliceridemia era el producto del enriquecimiento en triglicéridos de todas las fracciones de lipoproteínas y causados no solamente por el incremento en los niveles de VLDL. En la fase aguda, convalecencia y recuperación observamos una substancial fracción de VLDL mas grande y menos densa que tiende a formar agregados, con diámetro de 168 ± 49nm con anormal movilidad electroforética en angarosa. La fracción contiene apo B-100 como mayor apoproteína y es rica en triglicéridos. La persistencia de los cambios observados en el metabolismo lipídico en repetidas infecciones podría contribuir al desarrollo de enfermedad arterial mas adelante en la vida del adulto.

Estusio de los valores de hemoglobina, hierro sérico, transferrina, proteínas totales y fraccionadas y su relación con el estado nutricional en niños con neumonía / Study of the valors of hemoglobin silken iron, transferrin, proteins totals and fractionals and its relations with the state nutritional in the children with pneumonia

Se realizó un estudio descriptivo prospectivo para explorar las modificaciones en parámetros bioquímicos durante la fase aguda y de convalecencia en niños con Neumonía y la relevancia del estado nutricional en el proceso infeccioso. Se estudiaron 51 niños (1 a 6 años de edad) que ingresaron al Hospital Pediátrico "Dr. Elías Toro", en el período abril 1994-febrero 1995, con diagnóstico de neumonía según criterios IRA-OMS. Los niños se clasificaron nutricionalmente empleando indicadores antropométricos OMS. Se determinó al ingreso y egreso; concentración de Hemoglobina (Hb), hierro sérico (Fe), capacidad total de enlazamiento de hierro por la Transferrina (TIBC), proteínas séricas totales y fraccionadas. Al ingreso 73.6 por ciento de los niños poseía valores de Hb menores a 10 g/dL, 98 por ciento presentaron Fe menor al 11 µmol/L. Los valores TIBC de todos los niños estaban en el rango de referencia tanto al ingreso como al egreso. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas en las concentraciones de proteínas séricas totales respecto a la condición nutricional. La variación en la fracción proteica Alfa-1, observada al ingreso respecto al egreso, mostró diferencia estadística en los grupos de nutridos y desnutridos agudos. El proceso infeccioso pareciera modular los cambios bioquímicos descritos en el grupo de niños nutridos y desnutridos leves incluidos en el presente estudio

Estudio multicéntrico abierto de evaluación bioquímica y hematológica de recién nacidos empleando sangre de cordon umbilical / Open multicenter study of the biochenistry evaluation and hematologicals of the infant newborn employment blod of umbilical

La evaluación integral contínua es importante en las etapas del crecimiento fetal y el período neonatal, permitiendo detectar precozmente deficiencias o privaciones nutricionales durante la vida intrauterina. Con el objeto de conocer los valores de hemoglobina, hematocrito y componentes bioquímicos de recién nacidos y sus madres de dos Centros Hospitalarios de Caracas, Hospitales "Miguel Pérez Carreño" y "José Gregorio Hernández", empleando sangre de cordon umbical y sangre venosa de las madres para su evaluación, se realizó el presente trabajo. Los valores de hemoglobina y hematocrito de los recién nacidos se encuentran dentro del rango de referencia. Los hallazgos bioquímicos de laboratorio muestran valores en el rango de referencia tanto en los recién nacidos como en sus madres, excepto para el magnesio de los recién nacidos del Hospital "Miguel Pérez Carreño", en quienes se obtuvieron valores por debajo del rango de referencia. Se ampliará a otros centros hospitalarios este tipo de estudio, con el propósito de conocer los valores de referencia de estos indicadores bioquímicos en recién nacidos venezolanos y así mejorar sus condiciones de vida